主要功能用途
BMG LABTECH的FluoStar Omega功能熒光酶標(biāo)儀是在濾光片光學(xué)器件-光電倍增管檢測光路系統(tǒng)基礎(chǔ)上集成超快、全光譜CCD 光譜儀的多用途微孔板讀板平臺(tái)。其高性能濾光片光路,可實(shí)現(xiàn)多模式熒光、發(fā)光和常規(guī)酶標(biāo)儀可見光吸光、ELISA測定功能。快速濾光片切換可有效支持多波長激發(fā)和多波長發(fā)射檢測類應(yīng)用,如 FRET、BRET、FURA-2 和其他比率方法。此外,紫外/可見CCD光度計(jì)模塊使FluoStar Omega以每孔一秒的速度、1 nm的波長分辨率測定樣品220 - 1000 nm范圍吸收光譜。
FluoStar Omega檢測功能包括:
超快紫外/可見吸收光譜或基于濾光片光路的吸光度測定(如A260\A280\A230核酸純度濃度、蛋白Lowry、Bradford測定)
熒光強(qiáng)度(如核酸熒光染料、蛋白定量特異性染料)、熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)測定
時(shí)間分辨熒光(TRF)測定(如Delfia)
時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移(TR-FRET,如行HTRF、LANCE和LanthaScreen)
發(fā)光(閃光和輝光)、生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)
AlphaScreen/AlphaLISA
適用于以下應(yīng)用:
DNA/RNA 定量 (DNA/RNA quantifi cation)
蛋白質(zhì)紫外和熒光定量(Protein quantification)
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析(Signalling)
報(bào)告基因分析 (Reporter gene analysis)
酶促反應(yīng) (Enzymatic reactions)
實(shí)時(shí)細(xì)胞分析 (Real-time cell-based assays)
聚合研究 (Aggregation studies)
微量體積樣品吸光度測量 (Low-volume measurements)
細(xì)胞/細(xì)菌OD600生長曲線分析(Cell/bacterial growth)
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)
性能特點(diǎn)FluoStar Omega熒光測定儀所具有的應(yīng)用靈活性、測試靈敏度或動(dòng)力學(xué)范圍,可作為生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、研發(fā)分析的理想選擇。1、超快UV/Vis全波長吸收峰掃描和濾光片式固定波長吸光度測定的結(jié)合FluoStar Omega基于 BMG LABTECH 獨(dú)特的Tandem Technology——分光光度計(jì)全波長吸光度光譜儀和酶標(biāo)儀高靈敏度固定波長濾光片串聯(lián)檢測。先進(jìn)的CCD光譜儀能夠以每孔一秒的超快掃描速度和1 nm分辨率完成樣品220-1000 nm范圍紫外可見光完整吸收光譜的掃描。也可以基于酶標(biāo)儀固定波長濾光片方法,一次完成八個(gè)波長吸光度的檢測。
2、高性能的化學(xué)發(fā)光檢測FluoStar Omega發(fā)光檢測系統(tǒng)采用了發(fā)光專用光學(xué)元件,信噪比高,檢測限低,可用于96、384或1536孔板格式的閃光反應(yīng)(flash type,發(fā)光持續(xù)毫秒至秒時(shí)間,但發(fā)光能量集中,發(fā)光強(qiáng)度極高,測試靈敏度可達(dá)amol/孔)和輝光反應(yīng)(glow type,通常發(fā)光的持續(xù)時(shí)間達(dá)數(shù)分鐘甚至數(shù)小時(shí)以上)的化學(xué)發(fā)光測定。測試性能優(yōu)于Promega的Dual-Luciferase Reporter Assay技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),通過了基于96孔和384孔板測試的DLReady認(rèn)證,可用于雙熒光素酶報(bào)告基因的檢測。
3、強(qiáng)大的熒光檢測功能3.1 多色熒光通道檢測FluoStar Omega配備可高速切換的濾光片輪,多個(gè)濾光片的快切換功能允許使用多激發(fā)和多發(fā)射應(yīng)用。是多色熒光通道檢測和比率測定,如FRET、BRET、260/280 DNA定量、胞內(nèi)信號分子、鈣熒光探針等的理想檢測平臺(tái)。連續(xù)雙激發(fā)光和連續(xù)雙發(fā)射光檢測,特別適合FURA-2和其他比例法雙激發(fā)光應(yīng)用。3.2 時(shí)間分辨熒光TRF和TR-FRET檢測高亮度氙閃光燈、優(yōu)化的濾光片和信號的可調(diào)增益,使FluoStar Omega配置的先進(jìn)TRF光學(xué)頭,在執(zhí)行HTRF,LANCE,Delfia和LanthaScreen檢測時(shí)靈敏度優(yōu)于同類微孔板讀數(shù)儀。3.3 AlphaScreen/AlphaLISA采用FluoStar Omega即可勝任AlphaScreen/ AlphaLISA測定工作,用戶可以體驗(yàn)到通常在昂貴酶標(biāo)儀上才可用的AlphaScreen/AlphaLISA測定性能。
4、終點(diǎn)、慢速和快速動(dòng)力學(xué)在同一實(shí)驗(yàn)中,F(xiàn)luoStar Omega還可以以不同速率收集數(shù)據(jù)。既可以50個(gè)讀取點(diǎn)/秒的速度高速收集檢測信號,也可以每隔2.5小時(shí)采集一次的方式進(jìn)行。這樣便于捕獲在幾秒鐘內(nèi)發(fā)生的快速鈣信號,或者在幾天內(nèi)測量細(xì)菌的生長。
5、孔掃描模式(Well scanning modes)對于非均質(zhì)樣品,例如基于培養(yǎng)細(xì)胞的樣品測定,由于細(xì)胞在孔中分布不均勻,僅針對孔中心的單詞檢測是不夠的。FluoStar Omega配備了先進(jìn)的孔域掃描功能,可以在每個(gè)孔中進(jìn)行多達(dá)900點(diǎn)/孔的測定。還可以定義的螺旋或軌道上對每個(gè)孔進(jìn)行多次測量并計(jì)算平均值。
6、先進(jìn)的試劑注射和同步檢測許多檢測方法,如酶動(dòng)力學(xué)(enzyme kinetics)、鈣流量(calcium flux)和雙熒光素酶檢測(dual luciferase),都需要能夠在添加試劑期間、之后檢測信號。FluoStar Omega可以配備最多兩個(gè)內(nèi)置試劑進(jìn)樣器。,為6 - 384 孔板形式測試注入檢測試劑。進(jìn)樣器進(jìn)樣端位于微孔板的讀數(shù)位置,進(jìn)樣與讀數(shù)可同時(shí)進(jìn)行。內(nèi)置進(jìn)樣器還可有效保護(hù)任何光敏試劑。所有進(jìn)樣參數(shù)可以調(diào)整,例如進(jìn)樣速度,進(jìn)樣時(shí)間,振動(dòng)和每孔的進(jìn)樣次數(shù)。每個(gè)檢測孔的進(jìn)樣體積都是獨(dú)立可調(diào)的,因此可以在整個(gè)酶標(biāo)板范圍內(nèi)產(chǎn)生不同的稀釋梯度和濃度區(qū)域。
7、振蕩和孵育功能FluoStar Omega具有軌道、雙軌道或線性振蕩模式,可設(shè)定振蕩頻率,持續(xù)時(shí)間和振蕩模式混勻測試樣品。孵育功能可將測量室中的空氣溫度控制在45℃或65℃,適用于需在指定溫度下檢測的應(yīng)用,如酶活性動(dòng)力學(xué)測定等。
8、可選配的功能附件8.1 氣體控制附件FluoStar Omega可提供兩種形式的氣體控制附件。FluoStar Omega的大氣控制單元(Atmospheric Control Unit, ACU)由微處理器控制,可實(shí)現(xiàn)在0.1 - 20%范圍調(diào)節(jié)樣品測試環(huán)境中的O2和CO2含量。適用于缺氧、細(xì)胞遷移和侵襲、增殖和細(xì)胞活力、細(xì)菌生長、血管生成、病毒攝取等應(yīng)用。氣體排放口(Gas Vent)是一種正壓氣體吹掃,用于對測試樣品通入保護(hù)氣體(如惰性氣體、低氧氣體等),對樣品提供保護(hù)。
8.2 LVis 板(LVis Plate)LVis 板具有16 個(gè)2μL 樣品位,設(shè)置了左手和右手 8 道移液器吸頭支架,非常適合微量DNA/RNA/蛋白質(zhì)定量。
8.3儲(chǔ)板器(Stacker)和自動(dòng)機(jī)械臂兼容性FluoStar Omega熒光測定儀通過ActiveX或DDE接口進(jìn)行控制,可與大多數(shù)LIMS和自動(dòng)化平臺(tái)配合使用。中等通量實(shí)驗(yàn)提供帶條形碼閱讀器的50板自動(dòng)儲(chǔ)板器。
9、控制和分析軟件基于Windows設(shè)計(jì)的PC軟件提供了多方面的控制和分析功能,該軟件完全符合FDA 21 CFR Part 11的規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)。控制軟件能讓用戶自定義設(shè)定儀器的參數(shù)和實(shí)驗(yàn)步驟,能實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)顯示、檢測孔的獨(dú)立標(biāo)記、優(yōu)化動(dòng)力學(xué)分析、用戶自定義微孔板、多模式自動(dòng)進(jìn)樣、振蕩,可以跟其它分析軟件兼容的多模式數(shù)據(jù)輸出功能。數(shù)據(jù)分析軟件MARS能為用戶展示數(shù)據(jù)、單圖、光譜和2D/3D的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。數(shù)據(jù)可以通過預(yù)設(shè)的模板進(jìn)行處理,也可以對通過改變統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)來進(jìn)行處理。該軟件能生成標(biāo)準(zhǔn)曲線,并根據(jù)如下曲線擬合函數(shù)計(jì)算得到EC50、IC50和r2值:線性回歸擬合4-參數(shù)擬合點(diǎn)對點(diǎn)擬合分段回歸擬合三次樣條函數(shù)擬合2nd和3nd多項(xiàng)式擬合利用標(biāo)準(zhǔn)擬合等式即可快速的進(jìn)行酶動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)分析。
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