品牌: biomics
公司: 百奧邁科生物技術(shù)有限公司
提供商： Biomics Biotech 服務(wù)名稱： microRNA質(zhì)粒/載體構(gòu)建（過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建，靶基因報(bào)告載體/ 熒光素酶報(bào)告載體構(gòu)建 ）
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miRNA 過(guò)表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建
miRNA過(guò)表達(dá)載體是根據(jù)客戶需要，將完整的Pre-miRNA表達(dá)框克隆于II型或III型啟動(dòng)子的下游，通過(guò)轉(zhuǎn)染的方式將載體導(dǎo)入培養(yǎng)細(xì)胞，轉(zhuǎn)錄出Pre-miRNA進(jìn)而加工成成熟的miRNA，模擬內(nèi)源性miRNA發(fā)揮調(diào)控效應(yīng)和功能。
1、服務(wù)流程：a) 提供您所需要構(gòu)建miRNA名稱，miRbase登錄號(hào)或者序列，由我公司專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并給出報(bào)價(jià)；b) 簽訂miRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建合成合同，支付預(yù)付款；c) 設(shè)計(jì)合成引物， PCR反應(yīng)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物酶切；d) 將酶切產(chǎn)物純化，克隆至miRNA表達(dá)質(zhì)粒載體系統(tǒng)；e) 最后通過(guò)DNA測(cè)序，確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性；f) miRNA表達(dá)載體合成結(jié)束，發(fā)貨并向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
2 、提供結(jié)果a)質(zhì)粒；b) 測(cè)序圖譜/序列；c) miRNA載體構(gòu)建報(bào)告書。
miRNA抑制劑(Anti-miRNA)表達(dá)載體根據(jù)客戶需要，將含有一個(gè)或多個(gè)miRNA結(jié)合位點(diǎn)的序列克隆于II型或III型啟動(dòng)子的下游，通過(guò)轉(zhuǎn)染的方式將載體導(dǎo)入培養(yǎng)細(xì)胞，轉(zhuǎn)錄出含miRNA結(jié)合位點(diǎn)的RNA序列，可特異、高效地抑制生物體內(nèi)源性miRNA的活性，以進(jìn)行功能缺失性研究，是研究miRNA功能的必要工具。
1服務(wù)流程：a) 提供您所需要構(gòu)建miRNA名稱，miRbase登錄號(hào)或者序列，由我公司專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并給出報(bào)價(jià)；b) 簽訂miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建合成合同，支付預(yù)付款；c) 設(shè)計(jì)合成引物， PCR反應(yīng)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物酶切；d) 將酶切產(chǎn)物純化，克隆至miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體系統(tǒng)；e) 最后通過(guò)DNA測(cè)序，確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性；f) miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒合成結(jié)束，發(fā)貨并向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
2提供結(jié)果a)質(zhì)粒；b) 測(cè)序圖譜/序列；c) miRNA抑制表達(dá)質(zhì)粒載體構(gòu)建報(bào)告書。
miRNA 熒光素酶質(zhì)粒構(gòu)建Biomics構(gòu)建您所要研究的miRNA靶基因3’UTR區(qū)域，您只需將miRNA mimics與構(gòu)建好的靶基因載體共轉(zhuǎn)，即可檢測(cè)miRNA是否對(duì)靶基因有調(diào)控作用。當(dāng)您需要篩選與疾病相關(guān)的miRNA時(shí)，只須將疾病基因的3’UTR報(bào)告載體與miRNA文庫(kù)共轉(zhuǎn)，即可獲得大量可靠的miRNA調(diào)控信息，高效，準(zhǔn)確。
1服務(wù)流程：
a) 提供您所需要構(gòu)建的基因名，GeneBank登錄號(hào)或者基因3’UTR序列信息，由我公司專業(yè)技術(shù)人員根據(jù)序列具體情況設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并給出報(bào)價(jià)；
b) 簽訂3’UTR質(zhì)粒載體構(gòu)建合同，支付預(yù)付款；
c) 設(shè)計(jì)合成3‘UTR克隆引物，PCR反應(yīng)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物酶切；
d) 將PCR酶切產(chǎn)物純化，克隆至報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)；
e) 最后通過(guò)DNA測(cè)序，確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性，完成實(shí)驗(yàn)；
f ) 載體構(gòu)建完成后，發(fā)貨并向客戶提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
2提供結(jié)果
a) 裝載靶基因3’UTR的質(zhì)粒；
b) 測(cè)序圖譜/序列；
c) 載體構(gòu)建報(bào)告書。
3備注
客戶需準(zhǔn)備熒光照度計(jì)及雙熒光素酶檢測(cè)試劑盒。miRNA靶位點(diǎn)預(yù)測(cè)工具
miRNA的研究意義之重大是毋庸置疑的。然而，與新的miRNA的頻頻發(fā)現(xiàn)相比，miRNA的功能研究相對(duì)緩慢。到目前為止，在發(fā)現(xiàn)的4449多個(gè)miRNA中，確定功能的miRNA僅有幾十個(gè)。導(dǎo)致miRNA功能研究進(jìn)展緩慢的非常重要的原因是miRNA的作用靶標(biāo)難以確定。事實(shí)上，通過(guò)實(shí)驗(yàn)方法確定miRNA的作用靶標(biāo)非常耗時(shí)，目前尚無(wú)高通量的靶標(biāo)鑒定方法。因此，通過(guò)理論方法預(yù)測(cè)miRNA的作用靶標(biāo)成為當(dāng)前識(shí)別miRNA作用靶標(biāo)的較為理想的途徑。以下重點(diǎn)介紹幾種經(jīng)典預(yù)測(cè)軟件的算法分析，其他軟件（見(jiàn)下表）請(qǐng)查看相應(yīng)網(wǎng)站。
靶序列預(yù)測(cè)工具適用物種鏈接EMBL果蠅http://www.russell.embl-heidelberg.de/miRNAsmiRanda果蠅，脊椎動(dòng)物http://microrna.org/miranda.htmlPicTar脊椎動(dòng)物，果蠅http://pictar.bio.nyu.eduTargetScan脊椎動(dòng)物http://genes.mit.edu/targetscanRNA hybrid果蠅http://www.techfak.uni-bielefeld.de/persons/marc/mirna/targetsViTa病毒http://vita.mbc.nctu.edu.tvmiTargert動(dòng)物http://cbit.snu.ac.kr/~miTargetMiRTif動(dòng)物http://mirtif.bii.a-star.edu.sgmiRacle動(dòng)物http://miracle.igib.res.in/miraclemicroTar動(dòng)物http://tiger.dbs.nus.edu.sg/microTarEIMMo人，果蠅，線蟲(chóng)，斑馬魚http://www.mirz.unibas.ch/ElMMomiRU植物http://bioinfo3.noble.org/miRNA/miRU.htmlDIANA-MicroT人，鼠images/service/trtrtd width="113">RNA22動(dòng)物http://cbcsrv.watson.ibm.com/rna22.htmlMicroInspector動(dòng)植物、病毒http://mirna.imbb.forth.gr/microinspectorTarBase實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miRNA靶基因http://www.diana.pcbi.upenn.edu/tarbase.html
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