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一、轉染步驟：

1、質粒提取：使用無內毒素提取試劑盒

2、質粒溶解：溶于超純水或雙蒸水，一定不能溶于試劑盒Buffer等其他試劑

3、質粒熒光：若質粒不帶熒光、請使用熒光對照，方便查看轉染效率

4、質粒濃度：500-600ng/ul

5、質粒和轉染試劑復合物制備：質粒8ug和轉染試劑8ul，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無需也不能另外加入任何試劑稀釋

6、細胞轉染前狀態：拍照片留存

7、貼壁細胞鋪板：6孔板完全培養基2ml、培養基中不加雙抗，細胞密度：60%左右（不同細胞，按48小時生長到90%，往前推算細胞鋪板密度）

8、轉染：將復合物加入輕搖混勻、培養箱培養

9、換液：轉染24小時后培養基換液

10、轉染效率：轉染48小時后拍熒光照片，查看轉染效率

11、轉染后細胞狀態：拍明場細胞狀態照片

12、檢測：總計轉染48小時后提取RNA或蛋白檢測