Cellstain- Hoechst 33342 solution試劑貨號：H342
2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS號：23491-52-3
商品信息
儲存條件：0-5度保存，避光
運輸條件：室溫
分子式：
C27H31Cl3N6O
分子量：
561.93
特點：
●結(jié)合活細(xì)胞DNA
● 試劑盒穩(wěn)定性高。
●激發(fā)和發(fā)射波長分別為350 nm和460 nm
選擇規(guī)格：
1 ml
湊單關(guān)聯(lián)產(chǎn)品TOP5
NO.1.Cell Counting Kit-8 細(xì)胞增殖毒性檢測
NO.2. Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit細(xì)胞凋亡檢測
NO.3. Cellular Senescence Detection Kit細(xì)胞衰老檢測
NO.4. Calcein-AM/PI Double Staining Kit活死細(xì)胞雙染
NO.5. Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-細(xì)胞凋亡檢測
規(guī)格性狀
規(guī)格
特性：該產(chǎn)品為黃色液體
含量：試驗成功
產(chǎn)品概述
熒光染料Hoechst 33342是一種可對DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，也稱bisBenzimideH33342或HOE33342常用于細(xì)胞凋亡檢測。
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst染料可透過細(xì)胞膜并對DNA染色而發(fā)出強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光。它們在聚AT序列的富集區(qū)域的小溝處與DNA結(jié)合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持穩(wěn)定。Hoechst-DNA的激發(fā)和發(fā)射波長分別為350 nm和460 nm。
熒光特性
λex=352 nm, λem=461 nm
文獻(xiàn)
1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, “Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry”,J. Cell Physiol.,1980,102(2), 175.
2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang, “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex”,Biochemistry,1992,31(47), 11823.
3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe and Y. Nishimune, “Characterization of Histone H2A.X Expression in Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein Transgene”,Biol. Reprod.,2003,69, 1325.
4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K. Hitomi, “Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime Mold”,J. Biochem.(Tokyo),2004,136, 665.
5) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki,“Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes”,Cells.,2019,8, (4), 373
6) T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita,“Lactobacillus paracaseiKW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”,Int J Mol Sci,2020,21(14), 5091
常見問題Q&A
| Q1:如何使用Hoechst 33258。 |
| A1：有多種使用方法，但以形態(tài)觀察為例。
它用作觀察凋亡細(xì)胞中核變化（染色質(zhì)濃縮，斷裂）的簡便方法。
<試劑>
?細(xì)胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）
?熒光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）
?Dojindo的產(chǎn)物為[1 mg / mL]（約1.87 mmol / L）
<操作方法>
1.將含有約1 x 106個細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)基以400Xg離心5分鐘，并棄去上清液。
2.加入100μL細(xì)胞固定溶液，并通過移液或類似方法混合。
3.在室溫下靜置30分鐘。
4.離心400Xg，5分鐘，棄去上清液。
加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg離心5分鐘，棄去上清液。
（*此時，戊二醛經(jīng)常被洗滌和去除。可能會導(dǎo)致變色）
5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL熒光染料并混合。
6.將1滴（5）的細(xì)胞溶液滴在載玻片上，蓋上玻璃蓋，然后按邊緣。
7.在熒光顯微鏡下觀察。
*由田沼靖（YasushiTanuma）指導(dǎo)的細(xì)胞工程獨立體積實驗規(guī)程系列“細(xì)胞凋亡實驗規(guī)程” |
| Q2：細(xì)胞染料的激發(fā)波長和發(fā)射波長是多少。 |
| A2： |
| Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解決方案的激發(fā)波長和發(fā)射波長及其區(qū)別。 |
| A3:波長如下。
Hoechst33342 Ex：350 nmEm：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nmEm：461 nm
兩者的基本用法是相同的。
我們的產(chǎn)品是水溶液，所以稀釋至所需濃度并添加。
兩者之間的區(qū)別在于，它基本上是一種特異性結(jié)合腺嘌呤-胸苷部分的藥物。
它也穿過活細(xì)胞的膜并與活細(xì)胞的DNA結(jié)合。
Hoechst 33342的膜滲透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的選擇性抗體。 |
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