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天恩澤SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒 16-81920Ny，產品簡介：
產品品牌：天恩澤
產品名稱：SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒
英文名稱：SARS-CoV-2 N Gene Fluorescent and Colorimetric RT-LAMP Kit
產品貨號：16-81920Ny
產品規格：5

天恩澤SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化

RT-LAMP試劑盒 16-81920Ny

我們上海金山科研平臺公司作為天恩澤公司的代理商，先簡單介紹一下天恩澤公司：

北京天恩澤公司的目標是研發出技術先進、質量穩定、價格合理的試劑精品。公司的創立宗旨是技術至上、質量至上、服務至上，公司的產品研發團隊均為高學歷并在海外有長期的科研經驗；公司的管理團隊已在行業內擁有超過20年管理經驗；同樣，公司的運營團隊也有豐富的執行經驗。

北京天恩澤公司充分了解客戶的需求，并努力創新以滿足客戶不斷發展的需求。我們將與我們的客戶共同成長，成為生物技術領域中zhuoyue產品和服務的jijia提供者。

DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊商標(試劑類)。

天恩澤SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒 16-81920Ny，產品簡介：

產品品牌：天恩澤

產品名稱：SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒

英文名稱：SARS-CoV-2 N Gene Fluorescent and Colorimetric RT-LAMP Kit

產品貨號：16-81920Ny

產品規格：50次

產品價格：3390

天恩澤SARS-CoV-2冠狀病毒N基因熒光及可視化RT-LAMP試劑盒 16-81920Ny，產品說明：

2019 病毒，即 SARS-CoV-2，因 2019 年武漢病毒性肺炎病例 而被發現，2020年1月12日被世界衛生組織命名。冠狀病毒是一個大型病毒 家族，病毒是以前從未在人體中發現的冠狀病毒新毒株。人感染了冠 狀病毒后常見體征有呼吸道癥狀、發熱、咳嗽、氣促和呼吸困難等。在較嚴重 病例中，感染可導致肺炎、嚴重急性呼吸綜合征、腎衰竭，甚至死亡。常規的 檢測方法是熒光定量 RT-PCR，但該方法操作復雜，靈敏度度不是，容易 產生假陰性。為解決此問題，本公司開發了基于環介導等溫擴增（LAMP）的 產品，專門用于檢測病毒的N基因。它具有下列特點：

1. 一般60分鐘內出結果（取決于靶分子濃度），比PCR快約1小時。

2. 對20 μL的反應體系，大樣品加樣量達到14 μL。

3. 含可見光和熒光染料，既可以用金屬浴和水浴擴增用可見光肉眼判斷結果， 也可用熒光PCR儀進行實時熒光檢測。

4. 內含的dUTP-UNG可防交叉污染。

5. 特異性比PCR高，因為LAMP擴增使用4-6條引物而不是兩條。

6. 假陰性率低。

7. 提供無傳染性的陽性對照，便于分析實驗結果。

8. 只可用于科研，只可進行定性檢測，不能用于定量檢測。

9. 本產品足夠50次20 μL體系的LAMP 擴增和檢測反應。

規格及成分

|“運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照zhineng單獨放置，不要污染其 他試劑。

自備試劑 待測樣品。

使用方法 準備工作：如果使用水浴鍋或金屬浴，需要在實驗啟動前打開并調到65℃。如 果用金屬浴，還必須在孔中加水以填充金屬孔和反應管間的空隙。本公司發現 很多水浴鍋或金屬浴溫度不準，故建議先用陽性對照和陰性對照測試所用儀器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五個溫度下擴增效果，選擇陽性和陰性顏色差異大的溫度進行擴增。

一、樣品RNA的制備

1. 用自選方法純化樣品的 RNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒 RNA 提取試 劑盒兼容。也可以選購本公司的柱式病毒 RNAout。

2. 如果有 N 個樣品，則至少需要做 N+2 個樣品制備，包括一個制備陽性對 照（制備時加入自備的跟要檢測的靶分子相同的陽性對照模板，一起經歷 提取過程）和一個制備陰性對照（用水替代樣品）。后 N+2 個樣品一起 進行RNA 提取操作，得到N+2個RNA樣品。

二、熒光及可視化RT-LAMP擴增及檢測（20μL體系）

3. 反應設置：如果有N+2個RNA純化樣品，則設置N+4個RT-LAMP 擴增，增加 RT-LAMP 陰性對照和 RT-LAMP 陽性對照各 1 個。在 N+4 個0.2mL PCR管中加入下列成分：

4. 置混勻后進行擴增。由于本產品含雙染料，可以根據實驗室條件選擇下列 兩種方式進行擴增和檢測。

5. 如果使用金屬浴或水浴，則必須先在每個反應管中加30 μL石蠟油，否則 保溫期間反應體系的水分會蒸發，影響反應效率。65℃保溫90分鐘。

6. 如果使用熒光定量PCR儀：設聚合溫度65℃，1次循環1分鐘，90個循 環，每分鐘在FAM通道采集一次熒光信號。

三、結果分析及解讀

7. 如果是用水浴或金屬浴進行的擴增，反應結束后只能肉眼判斷結果。將反 應管放置在白色背景（如白紙）前觀察。擴增陽性對照管內反應液將呈現 藍色，無模板和無引物的陰性對照將呈淺藍色。如果擴增陽性對照管內反 應液不呈現藍色，或無模板和無引物的陰性對照任何一個呈現藍色，則說明試劑有問題，實驗無效。請跟廠家聯系。

8. 如果實驗有效，則樣品管的顏色接近擴增陽性對照管則說明有擴增，如果 接近無模板和無引物的陰性對照，則說明無擴增。反應結果示例如下（9 為陰性，10為陽性）

9. 反應結束后，如是用熒光 PCR 儀擴增，則可分析擴增曲線和 Ct。試劑盒 提供的陽性對照的Ct將小于60，如果大于60，說明試劑可能失效，需跟 廠家聯系。無模板陰性對照和無引物陰性對照的 Ct將大于60。如果小于 60，則說明試劑或環境被污染，需重復實驗或跟廠家聯系。如果對照結果 正常，說明實驗有效，再分析樣品。樣品的 Ct 在 60 以下的為陽性，60 以上的為陰性。 10. 當實時熒光檢測和可視化檢測同時使用時，如果不一致，以實時熒光LAMP 的數據為準。一般可視化結果滯后實時熒光檢測結果20-30分鐘，也就是 說，在 qPCR 儀上第 30 分鐘時呈現陽性的樣品，其顏色變化在第 50-60 分鐘時才能觀察到。

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