簡要描述：
進口寨卡病毒IgM抗體檢測試劑（德國IBL）可用于人血清和血漿（檸檬酸鹽）中寨卡病毒IgM抗體的定性檢測。
進口寨卡病毒IgM抗體檢測試劑（德國IBL)
【產品名稱】
通用名稱：寨卡病毒IgM檢測試劑盒（酶聯免疫法）
【產品規格】
96T/盒
【預期用途】
試劑盒可用于人血清和血漿（檸檬酸鹽）中寨卡病毒IgM抗體的定性檢測。
【檢測原理】
試劑盒采用酶聯免疫法。微孔中預包被有抗人IgG，用于結合樣品中相應的抗體。洗板后，去除非結合的樣品。再加入寨卡病毒原液，再次洗板后，再加入生物素化的寨卡病毒抗體。加入鏈霉親和素標記結合物（酶聯物），與固相的特異性的寨卡病毒合物結合。加入TMB底物液后，微孔中顯藍色。顯色的強度與病人樣品中寨卡病毒IgM抗體的量成正比。加入終止液終止酶反應，形成黃色終點產物。后在酶標儀處450 nm讀數。
【檢測方法】
試劑準備
試驗前，將所有試劑，樣品，質控品平衡至室溫(20~25℃)
寨卡病毒抗原：
每瓶加入1mL稀釋洗滌液溶解，緩慢加入，室溫下靜置溫育15min，制成即用型抗原液。此抗原液在2~8℃可穩定保存1天。
洗滌液：
1個單位的濃縮洗滌液+19個單位的雙蒸水。
如：10mL濃縮洗滌液+190mL雙蒸水。稀釋洗滌液在室溫下能穩定保存5天。開瓶后，濃縮的洗滌液在2~8℃可穩定保存至有效期.
檢測步驟
試驗前，仔細閱讀說明書。嚴格執行說明書要求才能得到優質結果。如試驗使用自動洗板機，建議每孔350µL，洗板5次（如手工洗，則每孔300µL，洗板3次）。試驗前，確定好樣品，質控品的加樣布局方案。取所需板條置于板架上。
至少設
1孔（如A1） 空白對照
1孔 (如B1) 陰性質控
2孔 (如C1+D1） 臨界質控
1孔（如E1） 陽性質控
如覺得有必要，建議樣品和質控品都作雙份檢測。
試驗應按同樣的加樣順序加取試劑，避免不同的時間間隔造成誤差。
使用新的一次性加樣槍頭，加各質控品，樣品
調節恒溫箱為37±1℃
加50µL質控品和稀釋樣品至相應各孔中，設A1作為空白對照封板紙蓋板37 ± 1℃溫育1小時±5分鐘溫育后，移除封板紙，倒出微孔內液體，每孔用300µL稀釋洗滌液，洗板3次，避免洗滌液相互溢濺至其它微孔。每次洗板時，浸泡時間應大于5秒。后，在吸水紙上拍干，去除殘留液滴。
注意：洗滌步驟很關鍵。不充分的洗板，會導致不精確或錯誤上升的吸光度值。
除空白對照孔（A1）外，加50µL基孔肯雅熱液抗原液至各孔，蓋板室溫下溫育30分鐘重復步驟4除空白對照孔（A1）外，加50µL基孔肯雅熱液抗體液至各孔，蓋板室溫下溫育30分鐘重復步驟4除空白對照孔（A1）外，各加50µL鏈酶親和素酶聯物至各孔，蓋板室溫下溫育30分鐘重復步驟4加100 µLTMB底物液至各孔中黑暗處，精確溫育15分鐘按加TMB底物液的順序和速度，加100 µL終止液至各孔中。
藍色溶液在孵育過程中變為黃色。
注意：強陽性樣品會導致色原產生沉淀，沉淀的產生會對讀數產生影響。所以先用陰性基質進行預稀釋，建議1：1的比例稀釋，然后，再1個單位的預稀釋樣品+100個單位的樣品稀釋液。終結果（以U計算）乘以預稀釋因子2即可
加入終止液后，30分鐘內，在酶標儀450/620 nm處讀數
【結果計算】
用A1空白對照孔對酶標儀進行調零
如遇技術問題，酶標儀不能調零。 所測樣品的吸光度值減去空白對照的讀數值，
即可得到可靠的讀數。
在酶標儀處450 nm處測讀所有質控品和樣品的吸光度值。620 nm作為參考波長。
如進行雙孔檢測，計算吸光度均值。
實驗有效性標準
如試驗有效，必須滿足以下要求
·空白對照（A1）： 吸光度值< 0.100
·陰性質控（B1）： 吸光度值<臨界讀數
·臨界質控（C1+D1） 吸光度值0.150~1.300
·陽性質控（E1） 吸光度值>臨界讀數
如上述標準沒滿足，試驗視為無效，試驗應重測。
結果計算
臨界讀數是雙孔臨界質控的吸光度均值
示范：臨界吸光度值0.39 +臨界吸光度值0.37＝0.76 / 2 = 0.38
即吸光度值＝0.38
進口寨卡病毒IgM抗體檢測試劑（德國IBL)
?
Bio-Rad伯樂官網 |伯樂授權代理 |伯樂ddPCR| 伯樂Aminex| 伯樂層析填料色譜柱是專業的授權總代理區域代理經銷平臺。
? 如需詢價，請加客服QQ：1749072012 、客服微信：jinshanbio，或發送郵件到1749072012@qq.com
? 平臺為生命科學研究相關領域提供一站式耗材試劑儀器解決方案和采購服務，數據資源基于CC協議。
? 本文地址：
http://www.yeybxjkgt.cn/thread-45787.htm
QQ:1749072012