Monarch?高分子量DNA提取試劑盒（細胞和血液）–NEB酶試劑NewEnglandBiolabs
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產品資料 – 核酸純化 – 基因組DNA提取Monarch? 高分子量 DNA 提取試劑盒（細胞和血液） 收藏 貨 號規 格 價 格(元) 北京庫存上海庫存廣州庫存成都庫存蘇州庫存#T3050L50 preps4,799.00 有無無無無#T3050S5 preps839.00 無無有無無Download: isoschizomers|compatible ends|single letter code特性
?用于從細胞和血液中提取高分子量 DNA
?提取純化的 DNA 片段大小達到 Mb 范圍
?通過改變裂解過程中的離心速度，可輕松調節提取 DNA 的片段大小
?操作流程簡單、便捷（細胞樣品 30 分鐘，血液樣品 60 分鐘）
?獲得的 DNA 產量、純度和完整性極佳
?高效去除 RNA
?快速、高效的洗脫
?包含 RNase A 和蛋白酶 K
?是長片段測序的理想選擇
產品說明Monarch® 高分子量 DNA 提取試劑盒（細胞和血液）為從細胞和血液中提取完整的高分子量（HMW） gDNA 提供了快速的操作流程。該試劑盒利用標準的實驗儀器，將以下步驟整合優化，加速了提取過程。實驗流程包括：將細胞溫和裂解、根據需要提取長度不同的 DNA 片段、以及將 DNA 附著于大玻璃珠表面。根據標準流程提取的 DNA 在 50-250 kb 之間，如果將離心速度降到最低，提取的 DNA 可達 Mb 范圍。純化后的 DNA 產量和純度極高，且幾乎完全不含 RNA。細胞樣品的提取時間僅為 30 分鐘，血液樣本需要紅細胞裂解，可在 60 分鐘內提取完成。A260 / A280 檢測純度為 1.80-1.90，A260 / A230 檢測純度為 2.2-2.5，實驗操作簡單、重復性好，純化后的 HMW DNA 適用于多種下游應用，包括長片段測序（Oxford NanoporeTechnologies®和 PacificBiosciences®），光學圖譜（BionanoGenomics®）和 Linked-Reads 基因組組裝。 圖 1：使用 Monarch 高分子量 DNA 提取試劑盒從細胞中提取純化 HMW DNA 的操作流程圖 2：使用 Monarch 高分子量 DNA 提取試劑盒從血液中提取純化 HMW DNA 的操作流程
圖 3：Monarch 高分子量 DNA 提取試劑盒從血液和細胞中提取 HMW DNA 的重復性好
使用 Monarch® 高分子量 DNA 提取試劑盒（細胞和血液）提取 DNA。提取樣品為 1 x 106 新鮮 HEK293 細胞和 500 µl 新鮮人血樣，按照試劑盒說明使用電泳圖上方標注的離心速度進行制備。從平行試驗樣本中分別取 500 ng DNA 產物通過 PFGE 分離（在 BioRad® CHEF-DR® III 系統上，使用 1％ 瓊脂糖凝膠，6 V / cm，13℃ 電泳 20 小時，切換時間為 0.5-94 秒）。各樣品的產量和純度見下表標注。分子量標準為 Lambda PFG Ladder（NEB＃N0341）。圖 4：在從細胞和血液中提取 HMW 基因組 DNA 的裂解過程中，使用不同的離心速度可調節提取片段長度 將 1 x 106 HEK 293細胞和 500 μl 新鮮人血樣一式兩份提取 HMW DNA。在裂解步驟中，按照圖中標注的速度離心樣品，以控制 DNA 的片段化。從平行實驗樣本中取等量的 DNA 產物（細胞：500 ng；血液：650 ng）通過 PFGE 分離（在 BioRad® CHEF-DR® III 系統上，使用 1％ 瓊脂糖凝膠，6 V / cm，13℃ 電泳 20 小時，切換時間為 0.5-94 秒）。各樣品的產量、純度和 DIN 值見下表標注。分子量標準為 Lambda PFG Ladder 和 Lambda DNA-Hind III 消化 (NEB #T3041 and #N3012) 。圖 5：細胞和血液樣本上樣量與 DNA 產量的線性相關性根據說明書操作方案，將 HEK293 培養細胞和來自不同供體的新鮮人血樣作為樣品提取 HMW DNA 并記錄產量數據，裂解步驟中離心速度為 2,000 rpm。將原始樣品稀釋成 5 個不同的濃度，以覆蓋建議上樣量范圍。細胞樣品（≤5×105）和血液樣品（<500 µl）使用低樣品量推薦的上樣體積進行純化。在測量范圍內，上樣量與產量呈高度線性相關。
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