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核糖核酸酶H(RNaseH)-限制性內切酶-分子生物學

2023-10-29

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別名RNA酶H
英文名稱Ribonuclease H
儲存條件-20℃

■ RNase H內容

Ribonuclease H (20~60 U/μl) 600 U

5×Hybrid RNA Degeneration Buffer 300 μl

■ RNase H說明

RNase H是特異性分解RNA-DNA雜交體中的RNA鏈的核糖核酸內切酶,分子量為21,000,最適pH約為8.0。活性因子為Mg2+或Mn2+。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Escherichia coli HB101 containing rnh plasmid (pKH11) and regulator plasmid (pNT203) ■ 活性定義 以poly(rA)·poly(dT)為底物,在30℃、pH7.7的條件下,20分鐘內產生1 nmol酸可溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。

■ 純度

1.50 U的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III分解物在37℃下反應16小時,DNA的電泳譜帶不發生變化。 2.50 U的本酶和1 μg的超螺旋pBR322 DNA 在37℃下反應1小時,DNA的電泳譜帶不發生變化。 3.50 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反應1小時,RNA的電泳譜帶不發生變化。

■ 用途

1.通過Okayama-Berg法進行cDNA Cloning。

2.DNA-RNA雜交體的檢定。

3.在Oligo (dT) 存在下除去mRNA的Poly (A) 末端。

■ 使用注意

本酶由大腸桿菌重組體精制而成,雜質很少,是純度很高的制品。因此,即便是高濃度制品,大量使用也完全沒有問題。

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