SYBRGreenI(PCR級，10000X)-PCR試劑/耗材-分子生物學(xué)
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| 別名 | SYBR Green I(PCR級，10000X) |
|---|---|
| 英文名稱 | SYBR Green I(PCR級，10000X) |
| 儲存條件 | -20℃避光保存，有效期至少一年。 |
| 外觀（性狀） | 液體 |
| 單位 | 支 |
規(guī)格：50/100ul
保存：-20℃避光保存，有效期至少一年。
產(chǎn)品說明：
SYBR Green I 染料是一種直接與雙鏈DNA (dsDNA) 結(jié)合的熒光染料，是熒光定量PCR 最常用的DNA結(jié)合染料。在定量PCR中，SYBR Green I可與雙鏈DNA（dsDNA）非特異性結(jié)合后發(fā)出熒光，則可以通過檢測反應(yīng)體系中的SYBR Green I 熒光強度，達到檢測PCR 產(chǎn)物擴增量的目的。游離狀態(tài)下，SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光，一旦與dsDNA結(jié)合，其熒光增加1000倍，一個反應(yīng)發(fā)出的全部熒光信號與出現(xiàn)的dsDNA量成比例，且會隨擴增產(chǎn)物的增加而增加；所以通過檢測PCR 反應(yīng)液中的熒光信號強度，可以對目的基因進行準(zhǔn)確定量，同時還可以測定擴增的目的DNA片段的熔解溫度。
使用說明：
使用時，配置PCR反應(yīng)混合液，將10000×SYBR Green I濃縮液加入到PCR反應(yīng)體系，使終濃度為0.5×（0.2×到1×之間調(diào)整）。以上操作建議在冰上進行。
注：①反應(yīng)液配制方法和PCR 擴增條件請參照DNA聚合酶使用說明。
②Realtime PCR 擴增儀的使用方法，請參照各儀器說明書。
注意事項：
使用濃度對熒光PCR結(jié)果的影響
SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關(guān)鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低，這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出；而在高濃度時，將會抑制PCR反應(yīng)，降低PCR反應(yīng)效率。所以一般在使用SYBR Green I時應(yīng)根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度，反應(yīng)的終濃度為0.2×到1×之間。
鎂離子濃度的影響
提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應(yīng)的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應(yīng)時，鎂離子濃度比無SYBR Green I 的普通PCR 反應(yīng)高出0.5～3mM。
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