品牌: cobioer
公司: 南京科佰生物科技有限公司
提供商： 科佰生物 服務名稱： 免疫沉淀
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免疫沉淀（IP）：免疫沉淀是利用抗原抗體特異性反應純化富集目的蛋白的一種方法。抗體與細胞裂解液或表達上清中相應的蛋白結合后，再與Protein A／G或二抗偶聯的agaose或Sepharose beads孵育，通過離心得到beads－protein A／G或二抗－抗體－目的蛋白復合物，沉淀經洗滌后，重懸于電泳上樣緩沖液，煮沸5－10 min，在高溫及還原劑的作用下，抗原與抗體解離，離心收集上清，上清中包括目的蛋白和少量的雜蛋白。
免疫沉淀實驗用途非常廣泛，而且基于最基本的免疫沉淀實驗衍生出了許多免疫沉淀相關實驗手段（比如免疫共沉淀、染色質免疫沉淀）。
IP實驗對抗體質量要求頗高，而且完備的實驗設計是成功的基礎，科佰生物有非常豐富的IP經驗，會幫助客戶嚴格設計實驗，提高成功率。
免疫沉淀：
原理：IP是利用抗原蛋白質和抗體的特異性結合以及細菌蛋白質的“proreinA"特異性地結合到免疫球蛋白的FC片段的現象活用開發出來的方法。目前多用精制的proreinA預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應后，beads上的prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。
實驗流程:
1. 細胞裂解；
2. 總蛋白定量；
3. 去除非特異性結合蛋白；
4. 加入抗體和Preotein A/G agarose beads孵育；
5. 洗脫。
6. WB檢測沉淀下來的目的蛋白（可選，更外收費）。
樣品要求:
1. 客戶需提供待檢測樣品、免疫沉淀用抗體（也可由我們代購）；
2. 待檢測樣品可以是直接的待檢測蛋白樣品，也可以是細胞、組織或細菌樣品，但需收取蛋白抽提費用。樣本收集后應立即-20度保存，若長期保存應-80度保存；
3. 免疫沉淀常盡量提供未經凍存的新鮮蛋白樣品。免疫共沉淀：
原理：免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。其原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
實驗流程:
1. 細胞裂解；
2. 總蛋白定量；
3. 去除非特異性結合蛋白；
4. 加入蛋白X的抗體和Preotein A/G agarose beads孵育；
5. 洗脫。
6. WB檢測蛋白Y。
樣品要求:
1. 客戶需提供待檢測樣品、免疫沉淀用抗體和WB檢測用抗體（抗體也可由我們代購）；
2. 待檢測樣品可以是直接的待檢測蛋白樣品，也可以是細胞、組織或細菌樣品，但需收取蛋白抽提費用。樣本收集后應立即-20度保存，若長期保存應-80度保存；
3. 免疫沉淀常盡量提供未經凍存的新鮮蛋白樣品。
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實驗報告
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