品牌: genelb
公司: 上海晶萊生物技術有限公司
提供商: 晶萊生物 服務名稱: 多肽合成與修飾技術服務 規格: 實驗服務
產品詳情請聯系金山科研平臺微信:jinshanbio 實驗技術簡介:多肽合成是一個固相合成順序一般從C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發展成功了固相多肽合成方法以來,經過不斷的改進 和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質合成中的一個常用技術,表現出了經典液相合成法無法比擬的優點,從而大大的減輕了每步產品提純的難度。多肽合成總 的來說分成兩種:固相合成和液相多肽合成。實驗技術原理:多肽合成儀以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應 器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作最終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生,參加反應的氨基酸的側 鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前必須活化。實驗操作流程:1、去保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用一種堿性溶劑(piperidine)去除氨基的保護基團。2、激活和交聯:下一個氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。活化的單體與游離的氨基反應交聯,形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅使反應完成。循環:這兩步反應反復循環直到合成完成。3、洗脫和脫保護:多肽從柱上洗脫下來,其保護基團被一種脫保護劑(TFA) 洗脫和脫保護。多肽修飾類型:1、C端標記技術 :C端酰胺化(Amidation,C-termainal)、醛基化(Aldehydes)、醇基化(Alcohols)、pNA (p-Nitroanilide)AMC、AFC、巰基乙胺化(Cysteamide)、酯基化(Ester)、N-烷基化(N-Alkyl Amides)等2、N端標記技術 :乙酰化Acetylated (Acetylated)、Palmytolyl、HYNIC、生物素標記(Biotinylated)、Br乙酰化(Bromoacetylated)螯合反應(DOTA,DTPA conjugated)、甲醛化(Formylated)、十四烷基、十八烷基化(Myristoylated)琥珀酰化、棕櫚酸化、蘋果酸化、脂肪酸化等(Succinylated)3、熒光標記修飾:C端修飾:AFC, AMC, Dap(Dnp), Lys(Dye), pNA, Rh110N端修飾:Bodipy-FL, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-lodoacetamido fluoresceinRhodamine 110 and Rhodamine B Luciferin, EDANSFAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA4、環化反應:首尾成環,中間成環,特殊成環(N -> C or Head to Tail)2對二硫鍵,3對二硫鍵(Disulfide (S-S bond formation) .Trisulfide formation)天然產物活性肽成環(Cyclic-natural peptides )5、甲基化修飾:側鏈甲基化Lys(For),Lys(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N端甲基化(N-Me-Arg,N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N- Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)6、幾種特殊修飾:各 種偶聯(BSA, KLH conjugated peptides for antibody production )、磷酸化(Phosphoserine, Phosphothreonine, Phosphotyrosine)、磺化(Sulfated Tyrosine or Serine)、MAPS (Multiple Antigenic Peptide)、糖肽(Glycopeptides)、 PEG修飾(PEGylation)實驗注意事項:客戶提供:1、多肽序列、數量、純度及特殊要求2、凍干多肽可在-20度保存或室溫保存3、溶液肽遠比凍干形式不穩定,溶液應為中性PH(5-7)-20度保存。4、為避免樣品的反復凍融,最好分成小樣存放。交付標準:合成多肽、數據其他:大多數多肽的首選溶劑是超純抽氣水,稀乙酸或氨水分別對堿性或酸性多肽的溶解也有幫助。如果這些方法用過后還不溶解的多肽,建議用DMF,脲,guanidiniam,chloride,acetonitnle來溶解收費標準/服務周期/提供結果:歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電咨詢!做實驗,找晶萊!您的科研生涯,我們一路相伴!【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導、SCI、核心期刊等服務。全國統一咨詢服務熱線:4008-766-085【上海公司】上海市嘉定區槎溪路788弄1號17層【北京公司】北京市大興區科創十四街嘉捷·BDA企業匯16號樓三層【長沙公司】長沙市高新區麓谷大道627號新長海中心B2-403室 【技術咨詢】18500539084【公司郵箱】lab-china@genelb.cn【全國業務咨詢】北京:18810244671 上海:15800916241 長沙:15616228964 武漢:15201856307 西安:13651049420 廣州:18810244571 其他地區:13818286017【晶萊生物】已開展了數千個實驗外包項目。我們專注于醫學課題研究,已從課題申請、方案設計、試劑采購、模型構造、標本檢測、數據分析、以及對SCI撰寫與發表的支持,各個環節積累了數千個成功案例經驗,為數千個來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關實驗服務信息請咨詢晶萊生物
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