RNeasy Mini Kit (250)凱杰Qiagen試劑盒
RNeasy Mini Kit可從細胞、組織或酵母中快速純化高品質RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結合能力達100μg RNA。使用RNA
laterRNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動核酸純化儀上應用RNeasy Mini Kit實現RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結合能力為45µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結合能力為1mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結合能力為6mg RNA）。
RNeasy Mini實驗方案。
使用RNeasy Mini Kit純化的總RNA具有高質量，適用于多種下游操作。實驗方案還包括部分純化的RNA、體外轉錄本和酶反應RNA的回收。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠（酵母樣本需要）。因樣本來源的發育階段、種屬和生長條件的不同，從樣本中分離的RNA量也各異。由于RNA酶步驟富集的RNA種屬>200 nt，因此RNA產量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。
從多種樣本中純化高品質RNA。
使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的甲醛瓊脂糖凝膠電泳和northern印跡。從各種來源的樣本中分離總RNA（10 µg）上樣至各泳道。所有組織均來源于小鼠。酵母：Saccharomyces cerevisiae；E. coli菌株：HB101。32P標記的探針識別的（G）GAPDH；（E）翻譯延長因子EF-1α；和（O）外膜蛋白A序列。（E和O分別由瑞士巴塞爾大學的P. Philippsen和德國蒂賓根馬克斯-普朗克生物學研究所的U. Henning提供。）B. subtilis未采用探針檢測。M：0.24–9.5 kb RNA分子量標準。胚胎、Huh7和HeLa細胞泳道中的7.5 kb條帶（圖示）為核前體RNA。
對少至100個細胞的RNA進行RT-PCR。
使用RNeasy Mini Kit從圖示數目的HeLa細胞中分離的總RNA的RT-PCR。使用不含RNA酶的DNA酶酶切10 µl（1/5）洗脫液，并使用oligo-dT引物進行逆轉錄。使用2.5 µl（1/20）的cDNA混合物進行50 µl PCR。擴增452 bp的GAPDH片段。C-：陰性對照；C+：陽性對照；M：100 bp分子量標準。
RNeasy Mini離心柱。
RNeasy Mini Kit中提供RNeasy Mini離心柱。
RNeasy Mini Kit (250)凱杰Qiagen試劑盒
性能
RNeasy Mini Kit可從至多30mg動物或人類組織樣本，或從100–1 x 107個動物或人類細胞樣本或酵母中純化總RNA。
RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產量
| 樣本來源 | 起始材料 | 平均產量（µg） |
|---|
| 動物細胞LMHHeLaCOS-7淋巴細胞（未受激） | 1x 1061x 1061x 1061x 106 | 1215350.5 |
| 小鼠組織肝肺脾 | 10mg10mg10 mg | 401035 |
| 真菌細胞S. cerevisiae | 1x 107 | 25 |
原理
RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術整合了ben酚/異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度，簡化了總RNA純化技術。純化得到高品質的RNA，并且DNA殘留水平達到zui低。
操作流程RNeasy Mini Kit可從10–1 x 10
7個動物或人類細胞中、0.5–30mg動物或人類組織中或小于5 x 10
7個酵母細胞中方便的純化總RNA。先對樣本進行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結合到膜上（最多可結合100µg），污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應用，可在RNeasy操作過程中進行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應用的實驗方案可供選擇。應用
使用RNeasy技術純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1（10mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應用，包括：
Northern印跡、點印跡和狹縫印跡終點式RT-PCR定量real-time RT-PCR芯片分析Poly A+RNA篩選
| 特點 | 參數 |
| Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
| Elution volume | 30–100 µl |
| Format | Spin column |
| Main sample type | Tissue, cells |
| Processing | Manual (centrifugation) |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | Total RNA |
| Sample amount | 0.5–30 mg |
| Technology | Silica technology |
| Time per run or per prep | 20 minutes |
| Yield | Varies |
?
Bio-Rad伯樂官網 |伯樂授權代理 |伯樂ddPCR| 伯樂Aminex| 伯樂層析填料色譜柱是專業的授權總代理區域代理經銷平臺。
? 如需詢價，請加客服QQ：1749072012 、客服微信：jinshanbio，或發送郵件到1749072012@qq.com
? 平臺為生命科學研究相關領域提供一站式耗材試劑儀器解決方案和采購服務，數據資源基于CC協議。
? 本文地址：
http://www.yeybxjkgt.cn/thread-46613.htm
QQ:1749072012